GB/T 29661-2013 化妆品中尿素含量的测定 酶催化法

范围
本标准规定了化妆品中尿素含量的测定方法——酶催化法。
本标准适用于化妆品中尿素的定量测定，其定量下限为0.025%。

原理
样品在偏酸性条件下，所含尿素被尿素酶分解为铵盐，用酸滴定，由此计算尿素含量。

试剂和材料
除另 有规定外，试剂均为分析纯。水为 GB/T 6682 规定的三级水。
尿素酶: 0.5g以下可将0.25 g尿素于40°C~45°C在1h内完全分解。按照产品说明保存。
0.1mol/L盐酸: 配制方法按 GB/T 601。
0.1mol/L NaOH溶液: 称取0.40g NaOH固体，溶于100mL水中。
无水乙醇。
塑料薄膜。

仪器和设备
高型烧杯，100mL。
酸式滴定管。
超声波清洗仪。
磁力搅拌器。
pH计: 精度0.01。
分析天平: 感量0.01g。
恒温水浴锅。

分析步骤
试样制备
水剂类、乳液类、膏霜类(O/W)样品
称取均匀样品0.5g(精确至0.01g)于高型烧杯中，加入50mL水，用塑料薄膜封口，超声提取20min。
将高型烧杯放在磁力搅拌器上，边搅拌边滴加盐酸中和至pH4.0(用pH计, 不计量, 若溶液呈pH<4.0，则需滴加NaOH溶液到pH>4.0，再用盐酸中和至pH4.0，加入0.2g粉碎较细的尿素酶立即用塑料薄膜封口，置于 50°C水浴中不时的摇晃，30min后取出冷却至室温，边搅拌边用0.1mol/L的盐酸滴定至pH4.0，记录消耗的0.1mol/L盐酸标准溶液的体积V₁。同时做一空白试验，记录消耗的0.1mol/L盐酸标准溶液的体积V₀。
膏霜类(W/O)、油溶性样品
称取均匀样品0.5g(精确至0.01g)于15mL离心管中，加10mL无水乙 醇，超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40mL水，摇匀。
余下步骤与"水剂类、乳液类、膏霜类(O/W)样品"相同。
唇膏类样品
称取均匀样品0.5g(精确至0.01g)于15mL离心管中，加10mL无水乙醇，在80°C水浴中加热3min~5min使唇膏融化，涡旋1min，超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40mL水，摇匀。
余下步骤与"水剂类、乳液类、膏霜类(O/W)样品"相同。
平行试验
按上述步骤，对同一样品进行平行实验测定。

结果计算算
按式(1)计尿素含量，以%表示:

式中:
60.06 ——尿素的相对分子质量；
V₁ ——样品消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积，单位为毫升(mL)；
V₀ ——空白试验消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积，单位为毫升(mL)；
c   ——0.1mol/L盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
m  ——试验样品质量，单位为克(g)。
计算结果保留至小数点后1位。
注: 若检测尿素含量超过20%，需要以减少样品称样量的方式重新进行测定。

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